【研究进展】肉豆蔻的药理作用及质量标志物

肉豆蔻是肉豆蔻科植物肉豆蔻MyristicafragransHoutt.的干燥种仁，始载于《雷公炮炙论》[1]，性辛、温，归脾、胃、大肠经。肉豆蔻具温中行气、涩肠止泻之功效，可用于脾胃虚寒、久泻不止、脘腹胀痛、食少呕吐[2]。

肉豆蔻不仅在消化系统疾病的治疗中发挥效用，还具有调节神经系统和心脑血管、降血糖、抗癌、抗炎镇痛等药理作用，活性成分主要为木脂素类、苯丙素类及挥发油类。

肉豆蔻在消化系统疾病中主要发挥保肝护肠、抗胃溃疡及止泻等作用，活性成分为木脂素类和苯丙素类等，代表性成分为安五脂素（8）、nectandrinB（14）、甲氧基丁香酚（94）、肉豆蔻醚等，具体作用机制见图4。

肉豆蔻可治疗化学性肝损伤。肉豆蔻提取物及肉豆蔻木脂素（58）可通过上调过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）通路，减弱氧化应激，改善硫代乙酰胺引起的小鼠肝损伤[54]。肉豆蔻醇提物通过激活腺苷酸活化蛋白激酶α（AMPKα）磷酸化，抑制脂肪酸合成酶及调节元件结合蛋白的表达，从而减少体内外脂肪酸合成，缓解脂毒性大鼠肝细胞损伤[55]。肉豆蔻酚类化合物可降低L-天门冬酰胺酶致肝毒性小鼠的肝酶活性、炎症反应，增强抗氧化活性，改善肝细胞崩解和空泡化等现象。

安五脂素通过抑制c-Jun氨基末端蛋白激酶的磷酸化、细胞外调节蛋白激酶（ERK）的活化，降低丙氨酸氨基转移酶和谷氨酸转移酶活性，减轻顺铂诱导的小鼠肝损伤[57]。nectandrinB可增强叔丁基过氧化氢诱导的肝损伤小鼠的ERK磷酸化水平，激活核因子E2相关因子2（Nrf2）抗氧化通路，改善肝细胞氧化损伤[58]。甲氧基丁香酚通过抑制促肝纤维化基因mRNA和核因子-κB（nuclearfactor-κB，NF-κB）信号通路表达，减缓四氯化碳诱导的小鼠肝损伤[59]。综上，肉豆蔻提取物、木脂素类和苯丙素类可通过抑制氧化应激、肝脏炎症、脂肪堆积及肝纤维化来保护肝脏。

肉豆蔻护肠功能主要表现为缓解肠道痉挛和保护肠黏膜。Prashant等[60]发现肉豆蔻水提物可阻断乙酰胆碱受体和组胺受体松弛豚鼠的离体回肠，缓解肠痉挛。肉豆蔻挥发油通过抑制肠组织白细胞介素-8（interleukin-8，IL-8）和NF-κBp65蛋白表达，降低炎症水平，从而改善放射性肠炎小鼠的肠黏膜损伤[61]。肉豆蔻醚可上调直肠灌注乙酸诱导的结肠炎大鼠的Nrf2及血红素加氧酶-1的水平，降低结肠髓过氧化物酶活性及NF-κBmRNA表达，通过抗氧化、抗炎活性治疗溃疡性结肠炎及其黏膜损伤[62]。综上，肉豆蔻挥发油及苯丙素类成分通过调控神经递质、炎症因子和抗氧化酶的活性保护肠道。

肉豆蔻中马拉巴酮B和马拉巴酮C可通过上调黏蛋白含量，提高前列腺素E2水平，增加表皮细胞生长因子受体和环氧合酶表达，促进吲哚美辛诱导的胃溃疡小鼠伤口愈合[52]。Sattar等[63]研究推测肉豆蔻中改善乙醇致胃溃疡小鼠的主要活性成分为黄酮类化合物，其具体机制仍需进一步研究。以上表明肉豆蔻通过增加血管愈合相关激素和抗氧化改善胃部损伤。

肉豆蔻的原油悬浮液和石油醚提取物可分别通过增加豚鼠肠道张力和抑制回肠收缩发挥止泻作用[64]。

肉豆蔻具有抗痴呆、抗抑郁、抗帕金森和抗癫痫等药理作用，主要以苯丙素类和挥发油类成分发挥作用。

肉豆蔻醇提物具有较高的体外抗丁酰胆碱酯酶的活性和金属螯合能力，减缓H2O2诱导的大鼠肾上腺嗜铬PC12细胞神经元氧化损伤，预防阿尔茨海默病（AD），其物质基础可能为三肉豆蔻酸甘油酯（191）和5,7-diacetylchrysin（247）[48]。安五脂素防治AD的机制为通过降低p21、p27蛋白表达、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）及蛋白激酶B（Akt）等的磷酸化水平，从而提高小鼠小胶质细胞及海马神经元的生存率[65-66]。

肉豆蔻提取物可增强大鼠海马组织抗衰老因子Klotho水平，降低PI3K和Akt等磷酸化，改善慢性脑低灌注大鼠的空间认知能力，预防血管性痴呆[67]。肉豆蔻中甲基丁香酚（79）、丁香酚（83）、肉豆蔻酸（178）和β-谷甾醇经鉴定，可抑制东莨菪碱诱导的失忆大鼠体内外乙酰胆碱酯酶（AchE）活性，从而治疗痴呆和AD[68]。综上，肉豆蔻及其活性成分通过增强抗氧化抗炎能力，调节胆碱酯酶活性预防痴呆。

肉豆蔻正己烷提取物可通过增加5-羟色胺（5-HT）受体（5-HT2A/2C、5-HT3及5-HT1A等）及去甲肾上腺素（NE）的释放，降低小鼠悬尾不动时间发挥抗抑郁活性，其原因可能是肉豆蔻醚抑制单胺氧化酶活性[69]。肉豆蔻挥发油抗抑郁机制为提高小鼠脑内5-HT、多巴胺、NE的含量[70]。王锐等[33]发现肉豆蔻挥发油β-环糊精包合物可显著改善慢性温和不可预知性应激抑郁大鼠的自主活动状况，其抗抑郁活性成分可能为肉豆蔻醚、黄樟醚（78）等。李明慧等[71]基于网络药理学与分子对接发现，肉豆蔻抗抑郁机制可能为β-谷甾醇下调AchE和一氧化氮合酶的水平。综上，肉豆蔻挥发油等主要通过神经递质和内分泌途径来抗抑郁。

肉豆蔻中的安五脂素通过激活新生大鼠中脑中PPARγ和提高精氨酸酶-1表达水平为多巴胺能神经提供保护作用，防止炎症变性，进而改善帕金森病[72]。

肉豆蔻乙醇提取物可通过减少戊四氮诱导癫痫小鼠的神经元损失，改善胶质细胞活化，其抗癫痫物质基础可能为肉豆蔻酸、榄香素（82）和肉豆蔻醚[73]。具体机制见图5。

肉豆蔻中erythro-(7S,8R)-7-acetoxy-3,4,3',5'-tetramethoxy-8-O-4'-neolignan（55）可通过降低5-HT、三磷酸腺苷（adenosinetriphosphate，ATP）的释放，抑制血栓素B2的形成，增加环磷酸腺苷水平，减弱细胞内Ca2+交换，从整体上抑制凝血酶和血小板活化因子诱导的血小板聚集，从而预防心血管疾病和脑卒中[23]。长期服用肉豆蔻醇提物可促进大鼠红细胞和血小板的生成，对肝酶活性、尿素氮和肌酐水平无影响，可预防贫血、血小板减少等疾病[74]。

肉豆蔻可通过提高抗氧化酶及其受体的活性来调节血脂水平。不含黄樟醚的肉豆蔻醇提物可提高PPARα和PPARγ活性，降低血糖和三酰甘油水平，从而对2型糖尿病大鼠的高脂血症起治疗作用[75]。肉豆蔻挥发油可增加高胆固醇血症大鼠超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽的活性，降低脂质过氧化水平[76]。

肉豆蔻挥发油可通过提高心肌组织SOD含量，减少丙二醛含量，抗脂质过氧化保护大鼠缺血再灌注离体心脏；也可通过增加冠脉流量和负性传导等改善心律失常[77-79]。

肉豆蔻可调节血糖水平，预防心血管疾病。肉豆蔻通过激活GATA结合蛋白3/肝X受体α通路，上调ATP结合盒转运蛋白家族A亚家族成员1基因的表达，促进胆固醇外排和抗炎因子IL-10的产生，从而预防动脉粥样硬化等心血管疾病[80]。Yoshioka等[24]研究发现肉豆蔻提取物的正己烷部位可显著降低ig葡萄糖溶液小鼠的血糖水平，其活性成分为肉豆蔻醚、erythro-2-(4-allyl-2,6-dimethoxy-phenoxy)-1-(3,4-dimethoxyphenyl)-propan-1-ol（ADDP，56）、(7S,8R)-2-(4-allyl-2,6-dimethoxyphenoxy)-1-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-propan-1-ol（ADTP，57）和利卡灵B（35），均可促进大鼠骨骼肌L6细胞中葡萄糖转运蛋白4的易位，从而抑制餐后高血糖，其中ADDP和ADTP的混合物可通过促进AMPK磷酸化发挥作用。

利卡灵B通过激活PPARγ，上调胰岛素受体底物1、Akt和PI3K的磷酸化水平，作用于胰岛素信号通路，从而改善分化细胞中葡萄糖转运；诱导小鼠前脂肪3T3-L1细胞分化，增加三酰甘油的积累，促进脂联素分泌，从而改善体内血糖血脂，治疗糖尿病[81]。综上，肉豆蔻降血糖的机制涉及提高抗炎能力、改善葡萄糖转运、调节胰岛素通路和促进脂质代谢等。

肉豆蔻通过调节信号通路、ATP水平、DNA复制或改变线粒体功能等途径抑制癌细胞增殖。肉豆蔻醚可通过下调靶向表皮生长因子受体/ERK信号通路抑制体内外实验中胃癌细胞生长[82]；体外实验证明其对人结肠癌HCT116和LOVO细胞具有抗增殖作用，其机制为下调丝裂原活化细胞外信号调节激酶/ERK信号通路[83]；Seneme等[84]发现肉豆蔻醚还可通过结合多药耐药蛋白P-糖蛋白，协同化疗药物发挥抗癌作用。甲氧基丁香酚可通过上调p53/p21通路，损伤线粒体功能，进而抑制人子宫内膜癌细胞生长[85]。

去氢二异丁香酚可通过抑制癌细胞DNA的复制与生长，使细胞周期滞留，诱发自噬效应等抗结肠癌[86]。Chumkaew等[19]研究表明myticaganalC（40）对口腔癌和小细胞肺癌具有显著疗效，myticaganalA和B（38、39）及myrisfragealA和B（41、42）对以上2种癌及乳腺癌具有中等细胞毒性，4者对口腔癌的半抑制浓度（medianinhibitionconcentration，IC50）分别为17.9、20.3、20.6、15.9μmol/L，对小细胞肺癌的IC50分别为24.4、45.6、29.7、27.3μmol/L，对乳腺癌的IC50分别为17.1、22.7、21.4、14.3μmol/L。

肉豆蔻主要通过调节免疫及神经系统发挥抗炎镇痛作用。当机体免疫功能下降时，往往会引发炎症反应，从而导致相关疾病[87]，肉豆蔻醇提物可增强鲤鱼免疫应答[88]。宗伟英等[89]发现肉豆蔻醇提物还可通过抑制黄嘌呤氧化酶和肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α，TNF-α）活性，降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平，从而改善痛风性急性关节炎。肉豆蔻中1-(3',4'-dihydroxyphenyl)-3-(4''-methoxyphenyl)-propane（59）[26]及利卡灵B[20]可抑制小鼠巨噬细胞一氧化氮的生成，从而降低炎性介质刺激水平。肉豆蔻醚可降低细胞中TNF-α、粒细胞集落刺激因子、IL-1α等细胞因子水平，通过下调细胞内钙水平抑制一氧化氮的产生，从而发挥抗炎作用[90]。

Checker等[91]研究发现肉豆蔻木脂素类成分可增加哺乳动物脾细胞中伴刀豆球蛋白A刺激的淋巴细胞数量，增强免疫反应抑制炎症反应。安五脂素可通过抑制PI3K/Akt通路，呈剂量相关性抑制一氧化氮的产生，改善小胶质细胞炎症[66]。Qiburi等[92]发现去氢二异丁香酚可通过下调小胶质细胞的促炎因子和提高抗氧化基因的表达治疗神经炎症。在镇痛方面，肉豆蔻主要通过抑制慢性炎性疼痛模型小鼠中神经激肽1受体、环氧合酶-2及P物质减缓注射完全弗氏佐剂诱导的肿胀、机械性和高温诱发痛[93]。肉豆蔻中生物碱类成分可显著缓解乙酸所致小鼠内脏疼痛[94]。

肉豆蔻提取物、苯丙素类等是肉豆蔻抗菌作用的物质基础。肉豆蔻氯仿提取物对革兰阳性菌、白色念珠菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为1.56、25和3.12μg/mL[95]。肉豆蔻提取物（榄香素、肉豆蔻醚、甲氧基丁香酚等）可作为外排泵抑制剂抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌[96]。

肉豆蔻挥发油对细菌的抑制效果优于真菌，抑菌效果如下：金黄色葡萄球菌＞大肠杆菌＞枯草杆菌＞酿酒酵母菌＞黄曲霉[97]。肉豆蔻醚、丁香酚、α-蒎烯（97）对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、志贺氏菌、霍乱弧菌均有一定的抑菌活性，肉豆蔻醚、丁香酚还具有抗伤寒杆菌活性[98]。丁香酚可通过改变奇异假单胞菌细胞膜的完整性发挥杀菌作用[99]，还可通过下调半胱氨酸和蛋氨酸代谢S-核糖同型半胱氨酸酶基因、上调精氨酸和脯氨酸代谢N-乙酰-γ-谷氨酰磷酸脱氢酶基因抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性[100]。

肉豆蔻发挥抗氧化活性的机制为清除自由基和增加氧化酶等。肉豆蔻醇提物清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的IC50值为300µg/mL[101]。肉豆蔻挥发油可增强谷胱甘肽和SOD活性，降低丙二醛含量，具有良好的抗氧化作用[102]。肉豆蔻总黄酮因其酚羟基、酮羰基的结构特点，对具氧化损伤性的羟基、O等自由基有较好的清除能力[103]。去氢二异丁香酚和马拉巴酮B、C均具有较高的2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基清除能力[104]。

此外，肉豆蔻正己烷提取物可抑制黑色素生成[105]，肉豆蔻醚和甲基丁香酚可通过抑制下丘脑神经肽YmRNA表达来增强大鼠食欲[106]，利卡灵B可抗寄生虫[107]，肉豆蔻还具有壮阳、防龋齿、调节脂肪代谢[108]、防辐射[109]、保肾[110]、保护男性生育能力[111]等功能。

除此之外，肉豆蔻醚代谢生成可与N-乙酰半胱氨酸共价结合的1'-羟基肉豆醚，在250μmol/L时表现为对小鼠原代肝细胞显著的细胞毒性[114]。Demetriades等[115]发现服用50g肉豆蔻后患者出现心跳过速、心悸、口干、面部潮红等心血管异常症状，可能是由于类似血清素激动剂的丁香酚、异丁香酚（89）、黄樟醚和芳樟醇（109）发挥作用。目前对于肉豆蔻毒性反应的临床研究较少，从药食同源安全性角度出发可在后续研究中加强对该方面的研究。

肉豆蔻在临床上广泛应用，古今方剂中多与性味辛温，主入胃、大肠经的中药（丁香、补骨脂等）进行配伍，用于消化系统疾病的治疗。但随着现代药理作用的拓展，现代中药复方制剂不仅剂型多样，其也用于神经系统及心血管疾病的治疗，主要与性味苦酸平的诃子、广枣配伍。

肉豆蔻的临床应用在《圣济总录》《内科摘要》《普济方》《局方》等本草典籍中均有记载。配伍温补药，如补骨脂，可以脾肾双补、化湿止泻；配伍温阳散寒药，如附子，可以温中健脾、固肠止泻。主要用于治疗久泻不止、虚寒气滞、脘腹胀痛、食少呕吐等症状。本草典籍记载的肉豆蔻在古代方剂中的部分临床应用见表4。

含肉豆蔻的传统中成药剂型主要有丸剂、膏剂、散剂等，现代主要有片剂、冲剂、颗粒剂等。《校注妇人良方》收录的四神丸，肉豆蔻为臣药，具有温脾暖胃、涩肠止泻之功，助君药补骨脂温肾暖脾、固涩止泻。四神片收载于《中国药典》2020年版，其联合兰美沙拉嗪可治疗溃疡性结肠炎[116]，与双歧三联活菌胶囊联用治疗慢性功能性便秘[117]，与匹维溴铵联合可治疗肠易激综合征[118]。

在民族用药方面，肉豆蔻粉剂脐敷可用于治疗骨科患者术后腹胀便秘[119]；藏医含肉豆蔻的煳儿灸联合油脂涂擦可用于治疗神经性呕吐[120]；金诃愈心冲剂可用于治疗血栓和冠心病[121]。此外，肉豆蔻复方制剂在临床上可用于治疗心脏疾病，巴亚玛等[122]对30例窦性心动过缓患者进行口服肉豆蔻五味丸治疗，结果显示治疗组总有效率为66.67%，心律失常疗效较好。索朗平措[123]使用三味肉豆蔻汤剂治疗50例隆思型心绞痛患者，其中40例治愈，8例好转，2例无效，总有效率高达96%，尤其对情绪紧张和过劳诱因的心绞痛疗效显著。经药智网检索含肉豆蔻的中成药方剂共155种，对处方药物（频次≥10）进行关联规则分析。由图6可见，在临床应用中成药处方中，与肉豆蔻高频配伍的药材有丁香、木香、红花、诃子和沉香等。

肉豆蔻为历史悠久的药食同源中药，含有木脂素、挥发油等多种化学成分，疗效丰富，应用领域不断扩大。现代学者对其木脂素类和苯丙素类成分开展了一系列研究，但肉豆蔻醚等活性成分的毒性作用不容小觑。随其种类增多，药材质量参差不齐，临床疗效也存在一定差异，加之毒效兼具，目前单一测定指标已无法满足其质量控制需求。

本文在对肉豆蔻化学成分、药理作用、毒性研究及临床应用进行归纳总结的基础上，以Q-Marker为指导，进行了植物亲缘学和化学成分特有性、不同采收时期和炮制方法、成分与功效相关性、传统药性、复方配伍环境及化学成分可测性等分析。选取肉豆蔻特有的、可测定的、含量较高的药效活性成分，结合毒性研究筛选影响传统药性及复方配伍的有效成分，结果表明，肉豆蔻中的木脂素类、苯丙素类成分是其发挥临床疗效的代表性成分。故推测肉豆蔻内去氢二异丁香酚、肉豆蔻醚、安五脂素、甲氧基丁香酚、榄香素、丁香酚及α-蒎烯等成分可作为肉豆蔻的潜在Q-Marker，见图7。

肉豆蔻自古被誉为治疗虚寒性泻利之要药，但目前对其“止泻”单体活性成分及作用机制研究尚有欠缺，可结合肠道菌群与止泻中药具有双向调节的机制，对该疗效进行针对性研究。其次，主要成分肉豆蔻醚、榄香素、丁香酚等苯丙素类不仅具有广泛的药理活性，也会产生幻觉等中毒反应。与上述成分结构相关的黄樟醚和甲基丁香酚等已被定义为遗传毒性致癌物，故推测成分结构与药效、毒性间存在联系，但上述成分致癌性及基因毒性尚不明确，缺乏结构毒性研究和毒理学数据，有待深入探究。

现代肉豆蔻研究主要集中于化学成分的提取分离，其单体成分研究以木脂素和挥发性成分为主，但定量测定方法仍有待提升，且不同产地基原对比研究较少，肉豆蔻内黄酮等其他成分的研究也有待补充。基于其质量控制和临床疗效等方面的研究探索，更多的生物活性成分可作为其Q-Marker的备选，为肉豆蔻的质量控制体系提供参考，积极推进其应用与发展。