一、细胞培养所需的培养液
在细胞的研究和利用过程中，最主要的是要为细胞提供最适的生长条件，保持细胞培养开始时的群体状态。这就要求培养条件始终如一，近乎呆板地坚守细节和常规，而且细胞培养，试剂昂贵，费时、费力，不是随随便便就可以进行的。
细胞只有在最适生长条件下，才会保持正常的核型及功能。如果培养条件上打折扣，就意味着会出现带有染色体重排或突变变异株细胞。某些营养成分或生长因子用量不足或细胞高密度培养时间过长，都不是最适生长条件。
二、平衡盐溶液
平衡盐溶液具有维持渗透压、调节酸碱平衡的作用，同时可以供给细胞生存所需的能量和无机离子成分。最常用于洗涤组织或细胞、配制培养用液的基础溶液是Hanks溶液和磷酸缓冲盐溶液（简称PBS)。
三、血清
血清中含有丰富的营养成分，包括多种生长因子及许多未知成分。动物细胞的生长都依赖血清。血清的种类很多，包括胎牛血清、小牛血清、马血清、兔血清、人血清等。
四、抗生素
一般细胞培养时，抗生素不是必需添加成分。但一些特殊情况下培养液内需加入适量的抗生素，如怀疑有污染、原代培养时、新手操作不够熟练。常用的抗生素有青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素。青霉素常用剂量为100U/ml,链霉素常用剂量为100μg/ml。常配制成100倍或200倍，分装为小包装，于－20℃条件下保存。一次用一个小包装，避免反复冻融。
五、特殊的添加因子
特殊的添加因子可以使细胞培养的条件得到优化。原代培养细胞接种密度需适
当提高，应尽可能用营养丰富的培养液，如使用胎牛血清。这些都属于一般优化条件。细胞培养条件优化的原则是：根据细胞类型，模拟体内环境，添加不同的细胞生长因子及有利于细胞生存、增殖的添加剂。表1是常用的细胞培养添加成分。
表1常用的细胞培养添加成分
生长因子类
其他因子
其他物质
表皮生长因子（EGF)
转铁蛋白
硒酸钠
血管内皮细胞生长因子(VEGF)
胰岛素
二巯基乙醇(2ME)
神经生长因子(NGF)
可的松
佛波酯
肝细胞生长／分散因子(HGF/SF)
肝素
霍乱霉素
肥大细胞／干细胞因子(M/SCF)
牛／兔脑提取物
神经肽类内皮因子(ET-1，ET-2,ET-3)
鸡胚提取物
碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)
一种细胞生长因子常常是多种细胞的丝裂原，如碱性FGF,不仅是成纤维细胞的丝裂原，还是内皮细胞、角质细胞、黑素瘤细胞的丝裂原。EGF可促进上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞及平滑肌细胞等多种细胞的增殖。
体外培养正常细胞需要使用不同生长因子的选择性组合。通常在已有的经典培养液配方基础上，添加不同因子而成。现在已有多种特定细胞培养液，且有商品供应，如血管内皮细胞培养液、神经干细胞培养液、骨髓干细胞培养液、间充质干细胞培养液、小鼠心肌细胞培养液(ClaycomoMedium)等。
六、消化液
细胞生长至一定密度时，需进行传代。消化液可使细胞脱离生长表面，离散成单个细胞。常用的消化液是0.25%、0.125％的胰蛋白酶和0.02％的二乙胺四乙酸二钠(EDTA)溶液，以无钙镁的PBS或Hanks溶液配制。它们可单独使用，也可按一定比例混合后使用。大部分细胞的消化可使用终浓度为0.05%胰蛋白／0.02%EDTA混合液。有些上皮细胞贴壁力强，需较高浓度的胰蛋白酶(0.25%）或延长消化时间，甚至需要37°C温育。如果温育较长时间（超过20min)细胞仍不能脱壁，则应采取分步消化的措施，即将已脱壁细胞移出至离心管，加完全培养液中和胰蛋白酶的作用，对未脱壁的细胞再添加新胰蛋白酶再次消化。
七、细胞培养用的其他液体
细胞培养时，还会用到其他一些液体，如谷氨酰胺、HEPES、丙酮酸钠、各种细胞生长因子、各种组织或细胞条件培养液，以及调整pH使用的5.6%NaHCO3等。
谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，会导致细胞因生长不良而死亡。因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，故要适时添加。可配制200倍液体－20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内，终浓度为2mmoVL。
HEPES是一种非离子缓冲液，在~7.4范围内具有较好的缓冲能力，在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(0.34g/L)共用，以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。安全浓度范围10~25mmol/L。丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。一些生长缓慢的细胞加入，可明显改善细胞状态。通常配制200倍液，-20℃冰箱保存，在使用前加入培养液内终浓度为1mmol/L。
另外，2－巯基乙醇(2-Mercaptoethanol,2-Me)对细胞生长有很重要的作用。有人认为它相当于胎牛血清，有直接刺激细胞增殖作用。2-Me的活性部分是硫氢基，其中一个重要作用是使血清中含硫的化合物还原成谷胱甘肽，能诱导细胞的增殖，为非特异性的激活作用。同时避免过氧化物对培养细胞的损害。另一个重要作用是促进分裂原的反应和DNA合成，增加植物凝集素(PHA)对淋巴细胞的转化作用，已广泛应用于杂交瘤技术。也开始用于一些难以培养的细胞。常用终浓度为5×10-5mol/L。常配制成0.1mol/L的储存液，用时每升培养液加0.5ml。
