在质量标准中，中药显微鉴别主要有组织鉴别、粉末鉴别、显微化学鉴别和显微限量检查等。
组织鉴别研究与应用
《中国药典》（1977年版）依据中药材组织鉴别研究的一些成果，首次收载了中药材与中成药的显微鉴别项目，填补了我国中药显微鉴别项目的空白。
一是中药材横切面的组织构造。根、根茎、藤茎、皮、叶、果实、种子类中药材等，一般需要制作横切片进行显微观察，必要时制作纵切片。中药材横切面在判断药材真伪方面有突出的作用，不但可以鉴别中药材的伪品与正品，还可以区分正品多基原植物药材的不同物种。
二是中药材表面特征。植物性中药材表面特征的研究与应用多是对植物的叶片、果实或植物茎的表皮组织的观察，可观察表皮细胞形态、气孔类型、毛茸特征和着生情况等。
具体有两种方法：一是整体封藏法。适用于很薄的叶片、萼片和花瓣等样品。具体方法是剪取约4mm的所需部位2小片，一反一正放在载玻片上，加水合氯醛试液加热透化完全，盖上盖玻片即可；也可放试管中加水合氯醛试液加热至样品透明，再取样装片。孢子、花粉粒、雄蕊或雌蕊等，可直接装片观察。二是表面撕离法。适用于较厚的叶片、萼片、花瓣及浆果、茎等。具体方法是用镊子将软化好的材料表皮轻轻撕下，面朝上放在载玻片上，加水合氯醛透化至透明，盖上盖玻片即可进行显微观察。
粉末鉴别研究与应用
中药粉末鉴定主要是指通过观察中药材的细胞、内含物和颗粒物质的显微特征来达到鉴定药材真伪的目的。通常用于药材粉末、外形较大或组织构造无鉴别特征的药材、破碎药材、含饮片粉末的中成药等。
随着中成药检验水平的不断发展，各版《中国药典》收载的显微鉴别项的中药成方制剂不断增加。
除了植物类药材以外，一些矿物或动物类药材也具有稳定的粉末特征，在中成药中也可以用于显微鉴别，以判别这些中药材是否被投料。如在中成药的质量标准中经常利用埋有细小方形结晶的淡黄棕色无定形团块鉴别麝香；利用表面有极细的菌丝体的无色体壁碎片鉴别僵蚕等。矿物类中药材如朱砂、金礞石、石膏等的粉末特征，在中成药标准中也经常被进行显微鉴别。
显微化学鉴别的研究与应用
显微化学鉴别法是有针对性地进行与目标成分产生沉淀、结晶、颜色或特殊变化的反应，通过检查中药材细胞壁或细胞内含物的化学物质的性质，从而达到鉴定的一种方法，具体包括显微化学反应和显微定位。
一是显微化学反应。显微化学反应是将生药的干粉、徒手切片、升华物或浸出液少量，置于载玻片上，滴加某些化学试剂使产生沉淀、结晶或特殊的颜色，在显微镜下观察反应结果，从而进行鉴定。
二是显微化学定位。显微化学定位一般用于中药材有效成分组织中的化学定位研究，确定其具体存在部位或动态转移途径。其应用必须在所鉴定的药材有效成分明确的情况下，然后选择对有效成分具有特殊反应的化学试剂，使之产生颜色或结晶，用显微镜确定有效成分的存在部位。
显微定量研究与应用
显微定量法是利用药材某种组织具有相对稳定数量的特点，采用质量分析法或容量分析法测定成分含量的一种方法。该法开辟了中药含量测定的新途径，尤其为有效成分不清楚的药材的含量测定提供了一种可能的解决方法。近年来，该法被应用到多种中药及中成药的含量测定研究中，具有简便、结果可靠的特点，但目前在质量标准中未见应用。
一是参比物显微定量。参比物显微定量法虽然具有操作简便、快速等优点，但在实际应用中存在误差较大等缺点，目前已经被非参比物显微定量法所取代。
二是非参比物显微定量。药材的显微特征是药材自身的固有常数，利用这一性质，有学者采用自身的显微特征代替参比物的方法，并利用容量分析法或质量分析法，对药材某一专属特征进行计量分析，创立了非参比物显微定量法。该法改进了参比物显微定量法的缺点，同时加入了现代统计法，使得到的结果更加准确、可靠。目前主要用于含量测定、质量判别、易混淆中药鉴别等领域，并且在中药显微特征常数与其活性指标成分的相关研究方面也取得一定进展。
显微技术的发展
一是偏光显微镜。偏光显微镜又名偏振光显微镜、极化显微镜，主要用于地质学上观察和分析矿石薄片的光学性质，故又称为矿物显微镜。在偏光显微镜下，非均质性（各向异性）的物体或某些分子排列没有次序的有机物会呈现出颜色不同、强弱不一的光彩，其他不起偏光作用的均质性（各向同性）物质在这种暗视野中不发出任何光彩，仍保持黑暗状态。目前，偏光显微镜用于中药鉴别正逐渐受到重视，但仍需不断积累研究资料。
二是扫面电子显微镜。扫面电子显微镜是1964年以后迅速发展的一种新型电子光学仪器，成像原理类似于电视摄影显像方式，可获得清晰的三维图像，具有直接观察样品表面结构、景深大、放大范围广、分辨率高等优点，主要应用于药材花粉粒、叶表面、种皮表面的鉴别研究。
三是显微摄影与图像分析。传统的显微鉴别多是在显微镜下观察特征后，手工描绘特征，难免有人为的主观误差。后来使用普通相机与显微镜相连的显微摄影弥补了这一不足，现在已将数码相机（或CCD）代替了普通相机，且可以用计算机对图像进行进一步的处理。目前，二者正在被逐步推广使用。图像分析技术有助于中药显微鉴别向人工智能化方向发展，并为近缘品种和混淆品种中药鉴别提供了比较可靠的分析手段。但因其只是部分组织特征的定性定量描述，并且技术规范性有待进一步完善，故现在只作为中药显微鉴别的辅助手段。
显微鉴别法存在的问题
显微鉴别一直是鉴别药材真伪的手段之一，有着其他鉴别手段不可替代的作用。但在显微鉴别时，由于中药材（饮片）或中成药的质量情况多种多样，当观察到中药材（饮片）样品为伪品或中成药存在按处方或制法规定不应该出现的显微特征时，如何下结论值得探讨。
一是检验中药材（饮片）时，当观察到一些标准规定以外的显微特征时，参考文献、对照药材都确认此种药材（饮片）不具有此种特征。如山药的地区习惯用药参薯，除可检出石细胞外，其他特征符合规定，该如何下结论。
二是检验以饮片粉末与浸膏混合投料的中成药制剂时，应以浸膏投料的饮片检出此种饮片的粉末特征。如镜检出现概率高于100%的（制片5张，每片都能检出），其他显微特征符合规定，该如何下结论。
三是检验含饮片粉末的制剂时，当饮片粉末粒度较细而导致粉末特征被破坏，或几种药材的特征相似难以甄别，是否可以使用另一些具有鉴别意义的显微特征作为辅助鉴别特征，帮助判断制剂中是否投入了此种饮片原料，以免出现假阴性，影响结果判断。
目前，在实际的中药显微检验工作中，检验人员除了必须掌握显微鉴别的操作规程外，对于显微鉴别结果的判定，仍是以各自的经验为主。因此，有必要在已有的显微鉴别操作规程（SOP）的基础上，增加一些判别方面的内容，以减少人为因素的影响。
（摘编自《中国药事》2018年8月第8期作者王珺张南平）
