悬尾实验(TheTailSuspensionTest,TST)是一项小鼠行为测试,可用于筛选潜在的抗抑郁药物,以及评估预期会影响抑郁相关行为的实验方法。请注意,这里建议的是小鼠而不是大鼠,原因我们会在后面的细节讨论中阐述。

悬尾实验设备,XR-XX203,上海欣软
1.TST悬尾实验不建议用较重的大鼠,因为大鼠只能通过它们的尾巴来支持它们的体重,这对大鼠来说是痛苦的。同样的道理,应该注意避免使用异常重的小鼠(例如用于模拟肥胖的小鼠),在这种情况下,实验者应该寻找替代性的测试,例如强迫游泳实验。
2.动物从居住环境带入实验环境应适应一段时间,通常至少一个小时。
3.实验环境应保持安静,突然大的噪音会使小鼠惊慌失措。
4.使用软件分析时,选择最佳对比度的背景:白鼠使用黑色背景,黑鼠使用白色背景;也可选择使用由上海欣软的带背光板专业实验设备;对老鼠的颜色没有要求,更可拍摄出高质量,高对比度的实验录相。
5.每只小鼠的实验空间多大?参考空间在55高*15宽*11.5cm左右,多通量实验时,为防止动物彼此观察或互相影响,中间用隔板隔开;动物悬挂在隔间中间,宽度和深度足够大,不能与墙壁接触。
6.悬挂后动物鼻尖与设备地板之前的距离多少?参考距离在20~25cm左右。
7.底部建议放置一个可拆卸的拖盘,收集粪便或尿液。
8.悬挂用的胶带应牢固地粘贴在小鼠尾部和悬挂杆上,并且足够坚固以承受正在测试的小鼠的重量。但是,胶带不应该过于粘滞,因为在实验结束会从尾部移除。胶带尺寸应统一,长度17厘米,从一端2厘米做标记。这个2厘米的部分用于将胶带连接到尾部,而剩余的15厘米用于悬挂小鼠;胶带应贴在尾部的尾端,尾部留2-3毫米的距离。
9.尾巴攀爬阻止器,小鼠在实验过程,会出现追求和攀爬它们自己的尾巴的现象,这是个普遍的问题。解决方法很简单,而且非常有效:将一段塑料管切成4cm长中空圆柱体(内径1.3cm左右,1.5g)放置在小鼠尾巴周围就能防止这种尾巴爬行行为。注意的是,在没有使用阻止器之前,已经成功爬上尾巴的小鼠知道逃生是可能的。因此应将这类小鼠排除。
10.分析时主要观察老鼠摇摆与挣扎的状态,其中摇摆状态是因为惯性导致,所以可以判定为不动的绝望状态;上海欣软研发的Visutrack分析软件可识别动物四肢活动量,通过计算分析活动量准确区分并识别出摇摆和挣扎行为。
11.实验结束后(通常是6分钟),将动物放回鼠笼,应轻轻将胶带从尾巴上拉下来,不要从尾巴上撕扯胶带,避免给动物带来痛苦;
12.清洁用品,每次实验完成,收集粪便和尿液,彻底擦拭悬挂盒。